羔羊消化器官的早期生长发育和瘤胃内主要消化酶活性的变化

选用健康无病的波尔山羊30只,饲养在相同条件下,分别于20日龄和60日龄,各选取体重相近的3只羔羊屠宰,研究羔羊消化器官的生长发育和瘤胃内主要消化酶活性的变化规律。结果表明:两个日龄之间,消化道各部位的重量差异显著(P<0.05);复胃或瘤胃重量占体重的比例差异极显著(P<0.01),小肠或大肠的重量占体重的比例差异显著(P<0.05);瘤胃、十二指肠、盲肠中的pH60日龄显著(P<0.05)高于20日龄;回肠pH60日龄高于20日龄,但差异不显著(P>0.05);皱胃pH60日龄低于20日龄;瘤胃液中淀粉酶和木聚糖酶的活性增长迅速,60日龄显著(P<0.05)高于20日龄,而纤维素酶和果胶酶虽有一定程度的增长,但差异不显著(P>0.05)。     

胚胎干细胞的研究进展

胚胎干细胞来源于附植前胚胎的内细胞团或附植后胎儿的原始生殖细胞具有发育全能性的细胞。本文从它的研究概况、生物学特性、胚胎干细胞的分离培养与建系等方面做一概述。     

党参和白术对脾虚北京鸭肠道CCK、VIP、SSmRNA表达的影响

采用利血平建立北京鸭脾虚模型,观察健脾益气中药党参和白术对脾虚北京鸭十二指肠和空肠CCK、VIP、SSmRNA表达的影响。结果表明:脾虚组鸭十二指肠和空肠CCK、SSmRNA表达都显著(P<0.05、P<0.01)低于正常组;党参预防组、治疗Ⅱ组以及白术治疗Ⅱ组治疗效果均显著,可使十二指肠和空肠CCK、SSmRNA表达回复到正常水平。说明党参具有预防脾虚的作用,且单独高剂量(中药浓度2g/mL)使用党参和白术能达到治疗脾虚的目的,其作用机理是通过调节胃肠激素在体内的平衡达到治疗脾虚泄泻的目的。     

传染性法氏囊病病毒JS株VP2基因真核表达载体的构建及其应用

应用RT-PCR方法从鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)JS株中扩增出VP2基因,并克隆入T-easy载体。序列测定分析结果表明IBDVJS株的VP2基因与国际标准强毒株的核苷酸序列同源性达98%,氨基酸序列同源性达99%以上。随后将VP2基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1/zeo( ),构建成功真核表达质粒pcD-VP2,pcD-VP2体外转染COS-1细胞,能在COS-1细胞中表达。利用pcD-VP2质粒进行动物实验,结果表明雏鸡免疫14d后在体内可检测到特异性抗体,pcD-VP2的真核表达质粒二次免疫诱导鸡产生对IBDV强毒攻击的保护率为67%,这一结果提示VP2基因具有重要开发应用价值。     

徐州地区鸭传染性浆膜炎的病原分离鉴定及药敏试验

从徐州地区临床疑似鸭传染性浆膜炎发病鸭中分离到细菌21株，通过细菌形态、培养特怔、生化试验和动物试验，鉴定为鸭疫里默氏杆菌菌株，对不同地区分离到的21株菌进行了24种常用抗菌药物的药敏试验，结果该24个菌株对头孢类药物、红霉素、链霉素、妥布霉素、新霉素、氯霉素、泰乐菌素、痢特灵等几种药物敏感性较高，对喹诺酮类、强力霉素、丁安卡那霉素、林肯霉素、庆大霉素、氟苯尼考、利福平、复方新诺明等均不同程度地产生了耐药性。不同地区分离到的鸭疫里默氏杆菌对不同抗菌药的敏感程度存在较大差异性，研究结果为该地区鸭传染性浆膜炎的药物防治提供了很好的理论依据.     

猪囊尾蚴囊液抗原制备及ELISA检测条件的优化

本试验采用SephadexG-200层析技术纯化猪囊尾蚴（Cysticercus cellulosae）的囊液粗抗原。共获得两种（CF1、CF2）层析抗原，以酶联免疫吸附试验（ELISA）判定抗原的最适包被浓度以及抗体的最适稀释倍数，各阶段最适反应条件，结果证明CF1具有特异性强、敏感性高、稳定性好、重复性强的特点可以作为免疫诊断囊尾蚴病猪IgG。     

重组牛皮蝇素A蛋白的免疫试验

用由毕赤酵母表达的皮蝇素A（Hypdermin A，HA）蛋白分别免疫新西兰大白兔和牦牛，了解该蛋白免疫效果。用两种不同分子量的重组HA蛋白分别免疫新西兰大白兔1次和2次，ELISA测其抗体消长规律。结果表明，3周后抗体水平达到峰值，后缓慢下降。50KD蛋白免疫效果较30KD蛋白好，差异非常显著（P〈0．01）。用其中50KD的重组HA蛋白分别在7月和9月免疫自然感染牛皮蝇蛆病牦牛，观察感染率和感染强度，ELISA测其抗体消长规律。结果表明，7月免疫组与9月免疫组感染率分别为83．3％和36．3％（对照组为55．5％）；平均感染强度分别为6．5和4．2（对照组为13．0），差异不显著（P〉0．05）。免疫后，抗体水平上升，3个月后缓慢下降。9月免疫组免疫效果较7月免疫组好，三组抗体水平差异非常显著（P〈0．01）。上述研究结果为防治牛皮蝇蛆病疫苗的深入研究和实践运用提供了参考依据。     

犬瘟热病毒Guizhou株血凝素基因的克隆及序列分析

参照已发表的文献合成1对引物，以犬瘟热病毒Guizhou分离株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板，RT-PCR扩增获得血凝素蛋白基因（H）901～1661位大小为761bp的片段，并将PCR扩增产物进行克隆和测序。将Guizhou株与GenBank数据库中的31株CDV及国内NanjingOP株的H基因序列进行同源性和系统发生树分析，发现Guizhou株的H基因部分序列与疫苗毒株Convac和Onderstpoort的同源性最低，只有90％；与日本野毒株Tanu96、KDK-1、Hmanatsu、Yanaka、UENO的同源性较高，为96％～98％；且与国内从大熊猫和小熊猫分离的野毒株GP和LP的同源性也较高，为98％和96％。系统发生树分析显示，Guizhou株与国内野毒株GP和LP，及日本的5个野毒株应属同一类，其中和GP株基因型最近，推测这些毒株间有更近的共同祖先。因此怀疑该病毒较适应于野生动物，且在我国某些地区的野生动物中可能存在自然疫源性传播。     

不同氟水平对生长育肥猪毒性的研究

96头始重(24.14±1.12)kg的杜长大三元杂交猪,随机分为4组。第1组为对照组,饲喂基础日粮(含氟量37.39mg/kg),第2、3、4组分别饲喂含氟(以NaF形式添加)量为100、150、200mg/kg的日粮,研究日粮中不同氟水平对猪生长性能和血清某些生化指标的影响,并探讨了氟在肝、肾和肌肉中的沉积,饲料氟和粪氟、血清氟、尿氟之间的相关关系。结果表明,第3、4组猪增重与对照组相比分别降低8.86%(P<0.05)和9.81%(P<0.05),料重比分别升高7.36%(P<0.05)和8.07%(P<0.05)。第4组血清钙、镁、白蛋白含量和碱性磷酸酶的活力与对照组相比分别降低了17.33%(P<0.01)、29.91%(P<0.01)、10.75%(P<0.05)和33.71%(P<0.01)。第3、4组肝、肾和肌肉氟含量与对照组相比显著增加(P<0.05)。各试验组粪氟、血清氟、尿氟含量随饲料中氟含量的增加而升高,且各组间差异极显著(P<0.001),饲料氟与粪氟、血清氟、尿氟含量相关系数分别为0.943(P<0.01)、0.911(P<0.01)和0.959(P<0.01)。     

毕赤酵母表达皮蝇素A蛋白

建立了用毕赤酵母表达系统表达皮蝇素A（Hypodermotin A，HA）的技术，并对表达条件进行了优化筛选。将皮蝇素A基因连接到质粒pPIC9k上，构建了重组转移质粒pPIC9k—HA。重组质粒通过电激转化入酵母细胞GS115后，用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选。重组酵母细胞在含0．5％甲醇的培养基中诱导产生目的蛋白，培养3d后收取上清，用阴离子交换层析柱分离纯化。经SDS—PAGE检测，所表达的蛋白相对分子质量约为30000。Western—blotting表明，该蛋白能与兔抗HA血清特异性结合。明胶电泳检测显示，该蛋白具有酶活性。单因素改变表达条件的结果表明，甲醇浓度在0．5％～1％、溶氧量在70％以上、诱导2～3d的情况下表达产量最高，达1500mg／L左右。该研究结果对防治牛皮蝇蛆痛疫苗的深入研究及毕赤酵母在寄生虫领域的应用有一定价值。